液相色譜紫外衍生反應

在液相色譜法中，紫外吸收檢測器是液相色譜儀最常見的一種高靈敏度的檢測器。但是有很多化合物在紫外可見光譜區(qū)沒有吸收，而不能被檢測。將它們與帶有紫外吸收基團的衍生試劑在一定條件下發(fā)生反應，由于反應產物帶有發(fā)色基團而被檢測。創(chuàng)用的紫外衍生化試劑及其應用如圖所示。

液相色譜儀大多數的紫外衍生試劑已用于光度法和定量有機分析法。新的紫外衍生反應和試劑也在不斷出現。許多熒光試劑在紫外區(qū)都有強吸收，故也可用作紫外衍生試劑。實質上，衍生反應是專門的有機合成反應，要求操作者對反應過程有較深的了解。首先要保證到較高的反應產率，其次要求重復性好。另外反應量僅在mg級甚至更低的情況下，還需要加入大量的試劑，過量的試劑和試劑中的雜質又會干擾測定。因此要在色譜進樣前，預先將試劑和反應產物進行純化。溶劑的影響也不容忽視，如溶劑會影響產率，尤其是極性溶劑和溶質之間有相互作用，溶劑對紫外吸收譜的強度、峰形和最大吸收波長等也有一定影響。