逆流色譜

任何一種分離方法都是基于混合物中被分離組分的某種物理性質(zhì)的不同而實現(xiàn)的。液液萃取避免了樣品的不可 逆吸附、失活和變性等問題。逆流色譜儀是一種多功能性的儀器，它可以進行一些其他與色譜無關(guān)的分離過程，比 如逆流泡沫浮選、逆流萃取等。

1．逆流分溶法源于 20 世紀 50 年代多極萃取技術(shù)（非連續(xù)性），多極萃取設(shè)備龐大復雜、易碎、溶劑體系容易乳 化，溶劑耗量大，分離時間長。后被離心分離色譜和螺旋管式逆流色譜逐漸取代。

2．離心分離色譜和螺旋管式逆流色譜

離心分離色譜和螺旋管式逆流色譜利用了離心力場來實現(xiàn)固定相的保留。建立在離心力場作用基礎(chǔ)上的逆流色 譜分 2 種，一種被稱為流體靜力學平衡體系，另一種稱為流體動力學平衡體系。建立在流體靜力學平衡體系的 逆流色譜儀，被稱為離心分配色譜儀或 CPC；建立在流體動力學平衡體系的逆流色譜儀被稱為 J 型逆流色譜儀 或者 CCC。

按照分離柱的旋轉(zhuǎn)方式可以分為 J 型逆流色譜儀、正交軸逆流色譜儀、非同步逆流色譜儀、離心分離色譜儀； 按照旋轉(zhuǎn)速度可分為高速逆流色譜儀和低速逆流色譜儀。其中不同的逆流色譜儀可以放置同一類型或者不同類型的 多個分離柱。

逆流色譜是一種特殊的液相色譜技術(shù)，它利用特殊的色譜柱實現(xiàn)了液態(tài)固定相的有效保留，其遵循基本的色譜 塔板數(shù)理論和經(jīng)典的色譜公式。逆流色譜是利用在離心力場的作用下實現(xiàn)固定相的保留而完成萃取。其中 CPC 是 通過離心式旋轉(zhuǎn)的分離柱而實現(xiàn)；J 型逆流通過分離柱進行行星式旋轉(zhuǎn)而實現(xiàn)，其萃取原理如下：

具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于中藥成份分離、保健食品生物 化學、生物工程、天然產(chǎn)物化學、有機合成、環(huán)境分析等領(lǐng)域。

由于溶劑系統(tǒng)的組合是多樣的，因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內(nèi)樣品的分離，同時在分離天然化合 物方面具有其獨到之處。

操作簡單 儀器操作簡單，對樣品的預(yù)處理要求低，一般的粗提物即可進行制備分離或分析。

回收率高 不需要固相載體，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失，理論上樣品的回收率可達 100%, 在實驗中只要調(diào)整好分離條件，一般都有很高的回收率。

重現(xiàn)性好 如果樣品不具有較強的表面活性作用，酸堿性也不強，即使多次進樣，其分離過程都保持很穩(wěn)定，而且重現(xiàn)性相當 好。

分離效率高，分離量較大 由于其與一般的色譜分離方式不同，能實現(xiàn)梯度洗脫和反相洗脫，亦能進行重復進樣，使其特別適用于制備性分離， 產(chǎn)品純度高，制備量大。